주요 특징:
- 분변성 대장균군 선택적 증균: 담즙산염은 비-장내 세균의 성장을 억제하고, 고온 배양 조건은 분변성 대장균군의 생존 및 성장에 유리하게 작용합니다.
- 대장균군 추정: 젖당을 탄소원으로 함유하고 있어 분변성 대장균군이 젖당을 발효하여 산과 가스를 생성하는 특성을 이용하여 검출합니다. Durham 튜브를 함께 사용하여 배양하면 가스 생성을 쉽게 확인할 수 있습니다.
- 수질 및 식품 위생 검사: 물, 하수, 식품 등의 위생 품질 관리에서 분변 오염 지표인 분변성 대장균군 유무를 신속하게 추정하는 데 널리 사용됩니다.
- 추정 시험 배지: EC Medium에서의 가스 생성은 분변성 대장균군의 존재를 강력하게 시사하지만, E. coli를 포함한 분변성 대장균군을 확정하기 위해서는 후속 선택 배지에서의 배양 및 확인 시험이 필요합니다.
일반적인 조성 (1리터 기준):
- 펩톤 (Peptone): 20.0 g
- 젖당 (Lactose): 5.0 g
- 담즙산염 혼합물 (Bile Salts Mixture): 1.5 g
- 인산이수소칼륨 (Potassium Phosphate, monobasic): 1.5 g
- 인산이나수소칼륨 (Dipotassium Phosphate): 5.0 g
- 염화나트륨 (Sodium Chloride): 5.0 g
- 최종 pH: 6.9 ± 0.2 at 25°C
[Difco] EC Medium 500G 제품 정보:
- 제품명: Difco™ EC Medium
- 제조사: Difco
- 제품 형태: 탈수 분말
- 포장 크기: 500g (일반적인 포장 단위)
- 제품 코드: 제조사 및 판매처에 따라 다를 수 있습니다. 일반적으로 210432 또는 유사한 코드를 가질 수 있습니다.
사용 방법 (일반적인 지침 – 상세한 프로토콜은 수질 및 식품 분석 표준 방법 참조):
- 제조사의 지침에 따라 EC Medium 분말을 멸균 증류수 또는 탈이온수에 녹입니다 (일반적으로 약 38 g의 분말을 1리터의 물에 녹입니다).
- 잘 혼합하고 가열하여 완전히 용해시킵니다.
- 필요에 따라 pH를 확인하고 조정합니다 (멸균 후 pH는 6.9 ± 0.2가 되어야 합니다).
- Durham 튜브를 거꾸로 세운 시험관에 배지를 분주합니다. Durham 튜브 내부에 공기가 없도록 완전히 잠기게 합니다.
- 121°C에서 15분간 고압 증기 멸균합니다.
- 멸균된 배지를 식힌 후 준비된 검체를 접종합니다. 검체의 양과 배지의 양은 검사 프로토콜에 따라 결정됩니다.
- 44.5 ± 0.5°C의 항온 수조 또는 항온 배양기에서 24 ± 2시간 동안 배양합니다. 정확한 온도 유지가 중요합니다.
- Durham 튜브 내의 가스 생성을 관찰하여 분변성 대장균군 양성 여부를 추정합니다.
결과 판독:
- 양성: Durham 튜브 내에 가스 방울이 형성된 경우 분변성 대장균군 존재를 시사합니다.
- 음성: Durham 튜브 내에 가스 생성이 없는 경우 분변성 대장균군이 존재하지 않거나 매우 낮은 수준임을 시사합니다.
참고:
- 정확한 사용 방법 및 배지 조성은 해당 [Difco] EC Medium 제품의 라벨 또는 제조사의 제품 설명서를 참조하십시오.
- EC Medium에서의 가스 생성은 분변성 대장균군을 추정하는 결과이며, E. coli를 포함한 분변성 대장균군을 확정하기 위해서는 후속 단계로 선택 배지에서의 배양 및 확인 시험 (예: EMB Agar에서의 특징적인 콜로니 형성, 생화학적 시험)이 필요합니다.
- 고온 배양은 분변성 대장균군의 선택성을 높이는 중요한 조건입니다.
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