[Difco] Gram Stain Stabilized 250ML

그람 염색의 기본 원리:

그람 염색은 세균 세포벽의 구조적 차이에 기반하여 염색되는 정도가 다른 점을 이용합니다.

1. 1차 염색 (Crystal Violet): 모든 세균 세포를 보라색으로 염색합니다.
2. 매염제 (Gram’s Iodine): 염색된 보라색 색소를 세포벽 내에 고정시키는 역할을 합니다. Crystal Violet-Iodine 복합체를 형성하여 세포에서 쉽게 빠져나가지 못하게 합니다.
3. 탈색 (Decolorizing Agent, 보통 알코올 또는 아세톤-알코올 혼합액): 그람 양성균은 두꺼운 펩티도글리칸 층을 가지고 있어 탈색 과정에서 수축되어 Crystal Violet-Iodine 복합체가 세포 내에 갇혀 보라색을 유지합니다. 반면, 그람 음성균은 얇은 펩티도글리칸 층과 외부 막을 가지고 있어 탈색제가 지질 성분인 외부 막을 용해시키고 얇은 펩티도글리칸 층의 색소를 쉽게 제거하여 무색으로 됩니다.
4. 2차 염색 (Counterstain, 보통 Safranin): 탈색된 그람 음성균 세포를 붉은색 또는 분홍색으로 염색하여 최종적으로 현미경 관찰 시 구별할 수 있도록 합니다. 그람 양성균은 이미 보라색으로 염색되어 있어 붉은색 색소가 뚜렷하게 나타나지 않습니다.

[Difco] Gram Stain Stabilized 250mL 제품 정보:

Difco는 그람 염색 키트 또는 개별 시약 형태로 다양한 용량의 제품을 제공합니다. “Gram Stain Stabilized 250mL”는 특정 시약 (Crystal Violet, Gram’s Iodine, Decolorizer, Safranin 중 하나)을 의미할 수 있으며, 일반적으로 다음과 같은 시약들이 안정화된 형태로 제공됩니다.

• Difco™ Gram Crystal Violet Solution, Stabilized (250mL): 1차 염색 시약으로, 안정화되어 침전 형성을 줄이고 염색 효율을 유지합니다.
• Difco™ Gram Iodine Solution, Stabilized (250mL): 매염제 역할을 하는 요오드 용액으로, 안정화되어 효능을 유지합니다.
• Difco™ Gram Decolorizer (250mL): 탈색제로, 알코올 또는 아세톤-알코올 혼합액일 수 있습니다. 안정화 여부는 제품에 따라 다릅니다.
• Difco™ Gram Safranin Solution, Stabilized (250mL): 2차 염색 시약으로, 안정화되어 염색 강도를 유지합니다.

제품 코드 및 정확한 명칭은 제조사 및 판매처에 따라 다를 수 있으므로, 구매 시 제품 라벨을 확인하는 것이 중요합니다.

일반적인 사용 방법 (각 시약별 지침):

1. 슬라이드 준비: 세균 도말 슬라이드를 건조 및 열 고정합니다.
2. Crystal Violet 염색: 슬라이드 전체를 Crystal Violet 용액으로 1분간 덮습니다.
3. 흐르는 물에 세척: 슬라이드를 기울여 흐르는 물에 부드럽게 2초간 씻어냅니다.
4. Iodine 처리: 슬라이드 전체를 Gram’s Iodine 용액으로 1분간 덮습니다.
5. 흐르는 물에 세척: 슬라이드를 기울여 흐르는 물에 부드럽게 2초간 씻어냅니다.
6. 탈색: 탈색제 (알코올 또는 아세톤-알코올)를 슬라이드에 몇 초간 흘려보냅니다. 탈색액이 흐르는 동안 보라색 색소가 더 이상 나오지 않을 때까지 주의 깊게 관찰합니다 (과도한 탈색 방지).
7. 흐르는 물에 세척: 즉시 흐르는 물에 씻어 탈색 작용을 멈춥니다.
8. Safranin 염색: 슬라이드 전체를 Safranin 용액으로 1분간 덮습니다.
9. 흐르는 물에 세척: 슬라이드를 기울여 흐르는 물에 부드럽게 2초간 씻어냅니다.
10. 건조: 슬라이드를 공기 건조하거나 여과지로 물기를 제거합니다.
11. 현미경 관찰: 유침 렌즈를 사용하여 세균의 색깔 (보라색 또는 붉은색/분홍색)과 형태를 관찰합니다.

주의 사항:

• 각 염색 시간은 세균의 종류, 도말의 두께, 시약의 농도 등에 따라 약간씩 조절될 수 있습니다.
• 탈색 단계는 그람 염색 결과에 가장 큰 영향을 미치므로 주의 깊게 수행해야 합니다.
• 안정화된 형태의 시약은 일반 시약보다 수명이 길지만, 보관 조건 (직사광선 피하기, 실온 보관 등)을 잘 지켜야 합니다.
• 정확한 사용 방법은 해당 [Difco] Gram Stain Stabilized 제품의 라벨 또는 제조사의 제품 설명서를 참조하십시오.