[Difco] Triple Sugar Iron Agar 500G

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[Difco] Triple Sugar Iron Agar (TSI Agar) 500G은 장내세균과(Enterobacteriaceae)의 생화학적 특성을 감별하는 데 널리 사용되는 복합 배지입니다. 세 가지 당 (젖당, 자당, 포도당) 발효 능력, 황화수소(H₂S) 생성 능력, 그리고 가스 생성 능력을 동시에 확인할 수 있습니다. 사면 배지 형태로 사용하며, 경사진 표면과 깊은 바닥으로 구성되어 산소 농도에 따른 미생물의 대사 활동을 관찰할 수 있도록 설계되었습니다.

주요 특징:

  • 세 가지 당 발효 시험: 포도당 (0.1%), 젖당 (1%), 자당 (1%)의 발효 여부를 확인하여 장내 세균을 분류합니다. 포도당만 발효하는 경우 초기에는 전체 배지가 산성화되지만, 포도당이 고갈되면 상층부에서는 탈아미노 반응으로 인해 알칼리성으로 되돌아갑니다 (사면은 적색 유지, 바닥은 황색 유지). 젖당 또는 자당을 발효하는 경우 지속적으로 산이 생성되어 전체 배지가 황색으로 유지됩니다.
  • 황화수소 (H₂S) 생성 시험: 티오황산나트륨(sodium thiosulfate)이 환원되어 황화수소를 생성하면, 배지에 함유된 황산제일철암모늄(ferric ammonium sulfate)과 반응하여 검은색 침전물을 형성합니다. 주로 배지 바닥에서 관찰됩니다.
  • 가스 생성 시험: 탄수화물 발효 시 생성되는 가스는 배지 내에 기포 형태로 나타나거나, 심한 경우 배지가 갈라지거나 시험관 밖으로 밀려나오는 형태로 확인할 수 있습니다.
  • pH 지시약: 페놀 레드(phenol red)는 pH 지시약으로, 산성 pH에서는 황색, 중성 및 알칼리성 pH에서는 적색을 나타냅니다.

일반적인 조성 (1리터 기준):

  • 육즙 추출물 (Beef Extract): 3.0 g
  • 효모 추출물 (Yeast Extract): 3.0 g
  • 펩톤 (Peptone): 20.0 g
  • 젖당 (Lactose): 10.0 g (1%)
  • 자당 (Sucrose): 10.0 g (1%)
  • 포도당 (Glucose): 1.0 g (0.1%)
  • 염화나트륨 (Sodium Chloride): 5.0 g
  • 티오황산나트륨 (Sodium Thiosulfate): 0.3 g
  • 황산제일철암모늄 (Ferric Ammonium Sulfate): 0.2 g
  • 페놀 레드 (Phenol Red): 0.025 g
  • 한천 (Agar): 12.0 g
  • 최종 pH: 7.4 ± 0.2 at 25°C

[Difco] Triple Sugar Iron Agar 500G 제품 정보:

  • 제품명: Difco™ Triple Sugar Iron (TSI) Agar
  • 제조사: Difco
  • 제품 형태: 탈수 분말
  • 포장 크기: 500g (일반적인 포장 단위)
  • 제품 코드: 제조사 및 판매처에 따라 다를 수 있습니다. 일반적으로 225730 또는 유사한 코드를 가질 수 있습니다.

사용 방법 (일반적인 지침):

  1. 제조사의 지침에 따라 TSI Agar 분말을 멸균 증류수 또는 탈이온수에 녹입니다 (일반적으로 약 60 g의 분말을 1리터의 물에 녹입니다).
  2. 잘 혼합하고 가열하여 완전히 용해시킵니다. 끓이지 마십시오.
  3. 멸균합니다 (121°C에서 15분간).
  4. 멸균된 배지를 시험관에 비스듬하게 분주하여 사면 배지를 만듭니다. 사면의 깊이는 약 2.5cm 정도가 적절합니다.
  5. 배지가 완전히 굳으면 멸균된 백금이 또는 루프를 사용하여 콜로니 중앙부를 찔러 바닥까지 접종한 후, 사면 표면을 지그재그로 긁어줍니다.
  6. 35-37°C에서 18-24시간 배양합니다. 결과를 최대 48시간까지 관찰할 수 있습니다.
  7. 사면의 색깔 변화 (적색/황색), 바닥의 색깔 변화 (적색/황색), 황화수소 생성 여부 (검은색 침전물), 가스 생성 여부 (기포 또는 배지 갈라짐)를 관찰하고 기록합니다.

결과 판독 (사면/바닥/H₂S/가스):

  • K/K (-/-/-): 포도당, 젖당, 자당 모두 비발효 (사면 적색/바닥 적색/H₂S 음성/가스 음성)
  • K/A (-/+/+/-): 포도당만 발효 (초기 전체 황색 → 사면 탈아미노화로 적색, 바닥 황색 유지/H₂S 양성 또는 음성/가스 양성 또는 음성)
  • A/A (+/+/-/-): 젖당 또는 자당 발효 (사면 황색/바닥 황색/H₂S 음성/가스 음성)
  • A/A (+/+/+/-): 젖당 또는 자당 발효, H₂S 생성 (사면 황색/바닥 황색/H₂S 양성/가스 양성 또는 음성)

주의 사항:

  • TSI Agar는 과열하면 탄수화물이 분해될 수 있으므로 끓이지 않고 완전히 녹이는 것이 중요합니다.
  • 결과를 판독할 때는 배양 시간과 접종 방법을 정확히 지켜야 합니다.
  • 황화수소 생성은 배지 바닥에서 주로 관찰되므로 주의 깊게 확인해야 합니다.
  • TSI Agar는 장내세균과 감별의 중요한 초기 단계이며, 최종 동정을 위해서는 추가적인 생화학적 시험이 필요합니다.

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